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非靶向代谢组学

代谢组学检测平台主要有核磁共振(NMR)气相色谱-质谱(GC-MS)液相色谱-质谱(LC-MS) 等分析平台,而每种平台都有一定的偏向性,研究者需要根据研究的目的、样本的类型等选择合适的分析平台,亦可以同时运用多种平台进行分析,达到更加完善、全面的研究目的。

NMR平台
优点:高通量;普适性;良好的客观性和重现性;快速(2~3 min/样);预处理简单,不需要衍生化和分离;无损伤性;能检测样品中大多数有机类化合物;仪器使用寿命长
缺点:检测动态范围窄;灵敏度和分辨率较MS低;样品用量相对大(0.1~0.5 mL);仪器成本高

GC-MS
优点:高通量;高精密度、灵敏度及重现性;具有可参考的标准谱图数据库,易于定性;样品用量适中(0.1~0.2 mL);可检测样品中大多数有机和部分无机分子
缺点:需要衍生化;需要分离;分析速度较慢(20~40 min/样);较难鉴定新化合物;不适用于难挥发性、热不稳定性物质的分析

LC-MS
优点:高通量;高分别率、灵敏度;检测动态范围宽;样品处理简单,不需要衍生化;样品用量少(10~100 μL);适用于热不稳定性、不易挥发、不易衍生化和分子量较大的物质
缺点:分析速度较慢(15~40 min/样);缺少可以参考的标准谱图数据库;较难鉴定新化合物;成本较高;仪器寿命较短

通过液质联用技术,代谢组学研究实验流程可分为样本采集及前处理、代谢物提取及浓缩、
上机检测以及数据分析,最终进行生物学解释。